类风湿性关节炎临床治疗方案的研究进展

类风湿性关节炎(RA)是一种临床上常见的全身性自身免疫性疾病,患者临床表现主要为对称性、涉及多个关节、慢性的关节疾病和滑膜关节炎,其发病相关因素主要涉及遗传、滑膜中T细胞、B细胞及细胞因子等免疫细胞等,但具体机制现仍不完全明确。目前,RA的临床治疗效果尚不理想,主要的治疗方法为常规药物、中医中药、外科手术及新技术疗法等。     

应用RNA干扰抑制目的基因在小鼠体内表达

目的研究RNA干扰(RNAi)对体外和体内基因表达的沉默作用。方法以PCR方法从基因组DNA中克隆出依赖于RNA聚合酶Ⅲ的H1启动子,并用于驱动RNAi片段的合成;构建特异性针对目的基因(绿色荧光蛋白,GFP)的RNAi载体(Pi)。将RNAi干扰载体和GFP载体转染NIH3T3细胞,应用荧光显微镜观察、RT-PCR、流式细胞技术(FACS)分析上述细胞中RNAi对目的基因GFP表达的抑制效果,进一步在个体水平将RNAi载体注入小鼠体内,研究RNAi对GFP表达的抑制情况。结果RNAi能有效地使NIH3T3细胞中GFP表达量降低约60%以上,并能有效地抑制GFP在转基因小鼠体内的表达。结论RNAi技术能抑制目的基因在体内外的表达,是一种有效的基因治疗工具。     

CT120反义寡核苷酸抑制肺腺癌细胞A549的生长

目的 探讨CT120基因与肺腺癌细胞A549生长、分化的关系。方法 构建含有CT120基因的反义表达载体（命名为pcDNA3.1-CT120）,并将该载体转染肺腺癌细胞A549,应用G418筛选,获得了稳定表达CT120反义基因的克隆（命名为pcDNA3.1-CT120-A549）。RT-PCR和Western blot 检测CT120表达。流式细胞仪和软琼脂集落形成实验分析细胞生长,同时用RT-PCR检测P53、CYCLIND1 和CDK4的表达。结果 成功构建了含有CT120基因的反义表达载体,而且该载体能够有效抑制CT120在肺腺癌细胞A549中的表达。抑制CT120基因的表达能够抑制细胞的生长,促进细胞凋亡。在稳定表达CT120反义基因的克隆中P53表达明显上调,CYCLIND1 和CDK4表达明显下调。结论 反义寡核苷酸抑制CT120的表达有可能是肺癌基因治疗的一个新的靶点。     

生物化学设计性实验教学的探索与体会

为提高生物化学实验教学效果,引入了设计性实验,并对教学方式和考核方式进行改革,成功地激发了学生的学习兴趣和探索精神,培养了学生的创新意识和科研能力。     

AOPP病人血清ChE、CK—MB和LDH活性的变化

目的 探讨急性有机磷农药中毒（AOPP）病人血清胆碱酯酶（ChE）、肌酸激酶同工酶（CK—MB）、乳酸脱氢酶（LDH）活性变化及其意义。方法 检测38例重度AOPP病人人院第1、3、7天血清ChE、CK—MB和LDH活性,以10例健康成人作为对照。结果 与对照组比较,AOPP组病人血清ChE降低,CK—MB、LDH升高,差异有显著性（F=142．515～513．542,q=4．505～42．764,P〈0．05、0．01）;与第1天比较,人院第3天、第7天AOPP组病人血清ChE升高,CK—MB、LDH降低,差异有显著性（q=17．665～45．655,P〈0．05、0．01）。随治疗进展,血清ChE、CK—MB和LDH活性呈逐渐恢复趋势。结论 血清ChE水平不能作为临床评价有机磷农药中毒程度的有效指标,而CK—MB和LDH可作为有机磷农药中毒程度、病情和预后的判断指标。     

不同强度和时程应激对大鼠海马HSP70mRNA习惯化表达的影响

目的：观察重复低强度强迫游泳应激后大鼠海马HSP70mRNA表达及习惯化表达;应激强度改变对HSP70mRNA表达的影响。方法：采用反转录-聚合酶链反应（RT PCR）方法,观察重复强迫温水游泳应激导致大鼠海马HSP70mRNA表达的变化和不同应激强度对HSP70mRNA表达的影响。结果：重复强迫温水游泳可导致HSP70mRNA表达习惯化,当再给予4?℃冰水游泳应激时,可引起HSP70mRNA表达增加。结论：重复应激可以导致HSP70mRNA表达习惯化,高强度应激可以逆转低强度应激引起的习惯化效应。     

丙戊酸钠对癫痫大鼠海马组织中Homerla、mGluR5表达的影响

[目的]探讨在戊四氮(pentetrazole,PTZ)致癫痫大鼠海马组织中Homerla、mGluR5的表达以及丙戊酸钠(sodium valproate,VPA)对其表达的影响. [方法]将SD大鼠分为正常对照组(NC)、PTZ组和VPA干预组.PTZ腹腔注射达到点燃标准,腹腔注入VPA 15 mg/(kg·d),对致痫大鼠进行治疗;30 min后,腹腔注射PTZ诱发癫痫发作;两周后分别于致痫大鼠发作后8h、24 h处死大鼠;应用实时定量PCR (realtime-PCR)、Western blot技术检测海马组织Homer1a、mGluR5的表达. [结果]1)NC组无癫痫发作,VPA干预组癫痫发作较PTZ组减轻;2)PTZ组Hmoer1a于癫痫发作后8h明显升高,24 h后则明显降低;VPA干预组Homer1a表达于癫痫发作后8h及24 h均升高;3)PTZ组mGluR5表达于癫痫发作后8h无显著变化,而24h后明显升高;VPA干预组mGluR5表达于癫痫发作后8h无显著变化,24 h后明显降低. [结论]1)丙戊酸钠可明显改善致痫大鼠发作表现;2)Homerla在癫痫发作后早期短暂性升高;mGluR5在癫痫发作后早期无明显变化,而发作后24 h升高;3)丙戊酸钠可能通过调节Homerla表达进一步影响mGluR5而发挥抗痫作用.     

生物化学教学中建构主义理论的实施策略与反思

结合生物化学的教学现状和建构主义的理论特点，分析了将建构主义理论用于生物化学教学的必要性和可行性。在此基础上，对生物化学教学过程中建构主义理论的实施策略进行了系统阐述，指出通过教学内容的合理选择，多种教学方法的优化组合，不仅有助于实现以学生为中心的知识主动建构，也有利于学生综合素质的提高。最后对建构主义理论进行了辩证思考，指出在具体的教学实践中，需结合实际情况，将不同教学理论加以合理的综合利用，使其优势互补以提高生物化学教学质量。     

Effect of acute and chronic stress on the expressiion of BDNF and BDNF mRNA in the hippocampus of rats

目的 观察急性应激和重复低强度强迫游泳应激后大鼠海马BDNF mRNA及蛋白在不同时间点的动态表达;观察慢性应激条件下动物行为改变.方法 用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法和Western blot检测海马BDNFmRNA及蛋白表达.结果 急性应激导致海马BDNF mRNA及其产物表达增加,3 h表达高峰(7.4147 ±0.6821,P＜0.01);慢性应激后BDNF蛋白表达降低,并在180和720 min两个时间点显著低于急性应激组(3.6581 ±0.2561;3.6051 ±0.4453,P＜0.05).结论 不同强度及时程应激对BDNF mRNA及蛋白表达有差异;慢性应激组大鼠BNDF mRNA表达存在一定适应现象.